Vplyv suplementácie indol 3 laktátom na zvieracie modely sklerózy multiplex
Začínam od nuly so základnými zručnosťami mechanika krovia.
Nie je toho veľa, čo by som pri dostatku času nedokázal urobiť, ale to je problém degeneratívnych ochorení.
Ako iste viete, je ťažké získať informácie od lekárskej profesie alebo dodávateľov chemikálií.
Chcem žiť.
Netvrdím, že to má význam, ale možno mi pomôžete pochopiť viac.
To najlepšie, čo som zatiaľ našiel, sú údaje na stránkach dodávateľov chemikálií:
Ako pripraviť zásobný roztok?
Vyberte vhodné rozpúšťadlo na prípravu koncentrovaného zásobného roztoku podľa požiadaviek experimentu. Informácie o rozpustnosti nájdete na stránke výrobku na našej webovej stránke. Pri in-vitro experimentoch sa ako rozpúšťadlo často používa DMSO.
Zásobný roztok sa potom zriedi, aby sa vytvoril pracovný roztok (napr. zriedenie 1:1000 v médiu bunkovej kultúry).
Tu sú uvedené niektoré odporúčania na rozpúšťanie produktu:
(1) Prepočítajte koncentráciu zásobného roztoku podľa nasledujúceho vzorca: Skutočná koncentrácia (mg/ml) = molekulová hmotnosť (g/mol) x koncentrácia (mM) x 10-3
(2) Skontrolujte, či rozpúšťadlo nebolo kontaminované,napr. roztok DMSO absorbuje vlhkosť.
(3) Niektoré zlúčeniny sa ťažko rozpúšťajú vzhľadom na ich štruktúru a chemické vlastnosti a môžu si vyžadovať dodatočné miešanie, napr. vírenie alebo ultrazvuk. V prípade potreby môže pri procese rozpúšťania pomôcť aj zahrievanie zlúčeniny. Nezabudnite však zlúčeninu zahrievať na teplotu vyššiu ako 45 ℃, aby ste zabránili zmene produktu.
Ako výrobok skladovať?
Skladujte pri teplote -20 ℃ alebo -80 ℃ Alikvótny zásobný roztok na bežné objemy na použitie a skladujte pri teplote -20 ℃ alebo -80 ℃ . Zabráňte opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu.
Ako pripraviť pracovný roztok?
(1) Vypočítajte požadované riedenie pomocou našej kalkulačky riedenia.
(2) Pomaly pridávajte zásobný roztok do rozpúšťadla, kým sa nedosiahne požadovaná koncentrácia.
Premiešajte vírením alebo opakovaným pipetovaním.
(3) Ak je v pracovnom roztoku prítomná zrážanlivosť, nechajte pracovný roztok 10 minút odstáť,vortexujte alebo premiešajte pipetou a potom znovu skontrolujte.
(4) Naše zlúčeniny sú väčšinou rozpustné v tukoch. Zrážanie môže byť prítomné pri riedení pomocou vodných rozpúšťadiel, ako je médium bunkových kultúr alebo PBS Úplné rozpustenie možno dosiahnuť ultrazvukom.
Na čo by som mal dávať pozor pri testoch na báze buniek?
Vo väčšine testov na báze buniek sa na prípravu zásobného roztoku používa DMSO. Zásobný roztok sa riedi v kultivačnom médiu na prípravu pracovného roztoku. Uistite sa, že koncentrácia DMSO je <=0,1 %, aby nedošlo k otrave buniek Zvyčajne je negatívnou kontrolou v experimente kultivačné médium s DMSO v rovnakej koncentrácii.
Na čo si mám dávať pozor pri pokusoch na zvieratách?
(1) Naše zlúčeniny sú väčšinou rozpustné v tukoch. Ak sa na prípravu zásobného roztoku použije DMSO a potom sa zriedi na prípravu pracovného roztoku pre pokusy na zvieratách, nemusí byť možné získať požadované dávky. Namiesto toho sú potrebné hydrotropné činidlá, ako je sodná soľ karboxymetylcelulózy (CMC-Na), Tween 80 alebo glycerol.
Napríklad na prepočet dávky použitej u myši(20 m/kg) na dávku použitú u 1,5 kg králika:
Zviera skupiny A: myš; zviera skupiny B: Králik;
Prevodný koeficient:
Dávka použitá u králika by bola 1,5 kg*(0,37*20mg/kg) =11,1 mg.
