Gerai, vaikinai! Laikas pasidalyti su jumis žiniomis. Aprašysiu psilocino sintezę, kurią atlikau, kartu su nuotraukomis. Panaudojau pagamintą psilociną ir sukūriau paprastą lipnų pleistrą. Norėdami patikrinti psilocino skvarbą pleistre, panaudojome mano sukonstruotą difuzijos aparatą. Jį sudaro kelios membranos, 1 cm^2 pleistras uždėtas ant 1 cm^2 šviežios žmogaus odos gabalėlio, kurio storis 400 um (padovanotas iš pilvo plastikos chirurgijos centro). Po oda yra nuolatinis vandens, kurio pH 7,4 ir kūno temperatūros, srautas. Difuzijos aparatu per valandą galima surinkti 1 ml frakciją, kuri vėliau analizuojama LC-MS metodu. Psilocino kiekis 1 ml buteliuke parodo srautą (mg/val./cm^2). Tai rodo, kiek psilocino praeina per valandą, kai pleistro dydis cm^2.
Į tai įsigilinama, nes psilocinas yra labai nestabilus. toliau pateikiamoje publikacijoje Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oksidacinės psilocino dimerizacijos metu gautų chromoforų struktūros išaiškinimas ir spektroskopinė analizė) aptariamas šis klausimas. Kai susidaro dimeras, jis neaptinkamas atliekant HPLC analizę ir ATR-FTIR, o tai yra keista. Dėl to mokslinių tyrimų grupės gauna klaidingus teigiamus duomenis apie psilocino grynumą. Radau būdą, kaip stabilizuoti psilociną pleistre.
Šiaip ar taip, pradėkime! Kiekvieną žingsnį atlikau pats, padedamas savo partnerio, kuris yra chemijos inžinierius. Tai buvo tuo metu, kai turėjau 1 ir 3 sąrašo DEA licenciją ne tik moksliniams tyrimams, bet ir gamybai.
I dalis (Psilocino sintezė)
1 žingsnis: 3-[2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-il acetato sintezė
1a. Į 2000 mL keturbriaunę kolbą su apvaliu dugnu buvo įmontuota viršutinė maišyklė, J-Kem temperatūros reguliatorius, 250 mL piltuvėlis ir guminė pertvara, pro kurią buvo įleistas teigiamo slėgio sausasN2. Perdanga buvo pašalinta ir kolba lygiavertiškai pripildyta 1H-indol-4-ilacetato (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalentas).
ir anhid Et2O (700 ml). Kolba buvo vėl uždaryta pertvara ir praplauta N2. Suspensija buvo maišoma 10 min. ir po to
30 min. atšaldyta iki 0 °C ledo vandens vonioje.
1b. Į lašinamąjį piltuvą buvo įpiltas oksalichlorido (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalentų) tirpalas Et2O (60 ml). Oksalio chlorido tirpalas buvo lašinamas lašeliniu būdu tokiu greičiu, kad būtų palaikoma ne aukštesnė kaip 5 °C temperatūra, siekiant sumažinti dimerų ir kitų galimų šalutinių produktų susidarymą. Toliau pridedant susidarė geltonos spalvos suspensija 10, o baigus pridėti, mišinys buvo maišomas 4 val.
1c. Po šio laiko buvo įpilta heptano (400 ml) ir mišinys maišytas 30 min. 0 °C temperatūroje. Gauta geltona kieta medžiaga buvo greitai filtruojama ir nuosekliai skalaujama heptanu (2 × 300 mL), kuris buvo greitai panaudotas kitame etape. . 2,0 M dimetilamino tirpalas THF (175 mL) buvo lašinamas lašeliniu būdu tokiu greičiu, kad būtų palaikoma žemesnė nei 5 °C temperatūra, siekiant sumažinti šalutines reakcijas. Po to, kai
(46 mL) į THF (100 mL) buvo lašinami lašai ir mišinys buvo gerai maišomas 60 min. Įpilta heptano (600 mL) ir kolbos turinys filtruotas perBiuchnerio piltuvą. Išfiltruotas likutis buvo perkeltas į apvaliadugnę kolbą, įpilta dejonizuoto H2O (1000 ml), maišyta 30 min. ir filtruota per Büchnerio piltuvą. Balkšva kietoji medžiaga buvo nuosekliai 40 min. trituliuojama EtOAc (600 ml) ir heptane (400 ml). Tirščiai buvo filtruojami per Büchnerio piltuvą, o kietoji masė buvo džiovinama 40 °C temperatūroje per naktį ir gaunama 6 kaip šviesiai geltona kieta medžiaga; išeiga: 66,1 g (81 %); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR patvirtino 3-[2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-il acetato sintezę. Šį junginį galima laikyti 4C temperatūroje kelis mėnesius!
2 žingsnis: Psilocino sintezė
2A etapas: 2000 ml kolboje su keturiais kakleliais ir apvaliu dugnu buvo sumontuota viršutinė maišyklė, J-Kem temperatūros reguliatorius
250 ml piltuvėlis ir guminė pertvara, pro kurią buvo įleistas teigiamo slėgio sausas N2. Pertvara buvo pašalinta ir
į kolbą nuosekliai įpilta 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-ilacetato (6; 31,5 g, 115 mmol) ir 2-CH3-THF (1000 ml).
mL). Kolba buvo panardinta į ledo vonią 0 °C temperatūroje ir per 0,3 M LiAlH4 tirpalą 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) buvo įpilta 2,3 M LiAlH4 tirpalo (140 mL, 322 mmol).
250 mL lašinamąjį piltuvą. Lašelinis piltuvas buvo papildomai praplautas 2-CH3-THF (20 mL). LiAlH4 tirpalas buvo lašinamas lašeliniu būdu
greičiu, kad būtų palaikoma žemesnė nei 20 °C temperatūra. Po pridėjimo ledo vandens vonia buvo pašalinta ir mišinys maišytas 30 min.
Šviesiai geltonas tirpalas buvo kaitinamas iki grįžtamojo srauto (80 °C), naudojant kaitinimo mantiją, ir po 3 val. tapo dramblio kaulo spalvos.
geltonos spalvos kietosios medžiagos kaupėsi ant apvaliadugnės kolbos šonų
2C etapas. Kaitinimo mantija buvo nuimta, o kolba atvėsinta iki 50 °C temperatūros. Kolba vėl buvo
atšaldyta iki 20 °C temperatūros. Reakcija buvo gesinama nuosekliai įlašinus 3 lašus 1 M aq NaOH ir 3 lašus dejonizuoto H2O. Mišinys
praskiestas THF (500 ml) ir maišytas 20 min. Mišinys buvo filtruojamas Büchnerio piltuvėliu, o filtratas laikomas po N2.
Filtravimo pyragas greitai vėl buvo išmaišytas su 200 ml [10 % (7 % amoniako MeOH) tirpalo CH2Cl2] ir THF (500 ml). Filtratai
buvo sujungti ir koncentruoti, kad gautųsi žalia kieta medžiaga. Kietoji medžiaga buvo trituliuota 1:1 EtOAc/heptanu (50 ml), tada filtruota per
Büchnerio piltuvu. Tamsiai žalia kieta medžiaga buvo džiovinta 40 °C temperatūroje per naktį ir gautas sausas psilocinas (7) kaip tamsiai žalia kieta medžiaga; išeiga: 20,7
g (91 %); mp 167-169 °C.
Psilocinas buvo susintetintas.
II dalis: Transderminio psilocino pleistro kūrimas ir in vitro tyrimas (DĖMESIO: JŪS MATYSITE ŠVIESĄ ŽMOGAUS LĖLĘS, JOS BJAURUMAS
Tada ištirpinu psilociną patentuotame akrilato polimero mišinyje (heptane), tada tirpalą supilu į atskyrimo liniją ir liejimo peiliu gaunu 100 um lipnų sluoksnį. Kai išdžiūsta, uždedu pagrindinį sluoksnį ir iškerpu 1 cm^2 dydžio pleistrą. Šis pleistras naudojamas in vitro tyrimui.
Toliau pateiktoje nuotraukoje užfiksuotas difuzijos aparatas (pleistras uždėtas ant odos, o apačioje bėga vanduo).
Tikiuosi, kad jums patiko!
Į tai įsigilinama, nes psilocinas yra labai nestabilus. toliau pateikiamoje publikacijoje Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oksidacinės psilocino dimerizacijos metu gautų chromoforų struktūros išaiškinimas ir spektroskopinė analizė) aptariamas šis klausimas. Kai susidaro dimeras, jis neaptinkamas atliekant HPLC analizę ir ATR-FTIR, o tai yra keista. Dėl to mokslinių tyrimų grupės gauna klaidingus teigiamus duomenis apie psilocino grynumą. Radau būdą, kaip stabilizuoti psilociną pleistre.
Šiaip ar taip, pradėkime! Kiekvieną žingsnį atlikau pats, padedamas savo partnerio, kuris yra chemijos inžinierius. Tai buvo tuo metu, kai turėjau 1 ir 3 sąrašo DEA licenciją ne tik moksliniams tyrimams, bet ir gamybai.
I dalis (Psilocino sintezė)
1 žingsnis: 3-[2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-il acetato sintezė
1a. Į 2000 mL keturbriaunę kolbą su apvaliu dugnu buvo įmontuota viršutinė maišyklė, J-Kem temperatūros reguliatorius, 250 mL piltuvėlis ir guminė pertvara, pro kurią buvo įleistas teigiamo slėgio sausasN2. Perdanga buvo pašalinta ir kolba lygiavertiškai pripildyta 1H-indol-4-ilacetato (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalentas).
ir anhid Et2O (700 ml). Kolba buvo vėl uždaryta pertvara ir praplauta N2. Suspensija buvo maišoma 10 min. ir po to
30 min. atšaldyta iki 0 °C ledo vandens vonioje.
1b. Į lašinamąjį piltuvą buvo įpiltas oksalichlorido (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalentų) tirpalas Et2O (60 ml). Oksalio chlorido tirpalas buvo lašinamas lašeliniu būdu tokiu greičiu, kad būtų palaikoma ne aukštesnė kaip 5 °C temperatūra, siekiant sumažinti dimerų ir kitų galimų šalutinių produktų susidarymą. Toliau pridedant susidarė geltonos spalvos suspensija 10, o baigus pridėti, mišinys buvo maišomas 4 val.
1c. Po šio laiko buvo įpilta heptano (400 ml) ir mišinys maišytas 30 min. 0 °C temperatūroje. Gauta geltona kieta medžiaga buvo greitai filtruojama ir nuosekliai skalaujama heptanu (2 × 300 mL), kuris buvo greitai panaudotas kitame etape. . 2,0 M dimetilamino tirpalas THF (175 mL) buvo lašinamas lašeliniu būdu tokiu greičiu, kad būtų palaikoma žemesnė nei 5 °C temperatūra, siekiant sumažinti šalutines reakcijas. Po to, kai
(46 mL) į THF (100 mL) buvo lašinami lašai ir mišinys buvo gerai maišomas 60 min. Įpilta heptano (600 mL) ir kolbos turinys filtruotas perBiuchnerio piltuvą. Išfiltruotas likutis buvo perkeltas į apvaliadugnę kolbą, įpilta dejonizuoto H2O (1000 ml), maišyta 30 min. ir filtruota per Büchnerio piltuvą. Balkšva kietoji medžiaga buvo nuosekliai 40 min. trituliuojama EtOAc (600 ml) ir heptane (400 ml). Tirščiai buvo filtruojami per Büchnerio piltuvą, o kietoji masė buvo džiovinama 40 °C temperatūroje per naktį ir gaunama 6 kaip šviesiai geltona kieta medžiaga; išeiga: 66,1 g (81 %); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR patvirtino 3-[2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-il acetato sintezę. Šį junginį galima laikyti 4C temperatūroje kelis mėnesius!
2 žingsnis: Psilocino sintezė
2A etapas: 2000 ml kolboje su keturiais kakleliais ir apvaliu dugnu buvo sumontuota viršutinė maišyklė, J-Kem temperatūros reguliatorius
250 ml piltuvėlis ir guminė pertvara, pro kurią buvo įleistas teigiamo slėgio sausas N2. Pertvara buvo pašalinta ir
į kolbą nuosekliai įpilta 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oksoacetil]-1H-indol-4-ilacetato (6; 31,5 g, 115 mmol) ir 2-CH3-THF (1000 ml).
mL). Kolba buvo panardinta į ledo vonią 0 °C temperatūroje ir per 0,3 M LiAlH4 tirpalą 2-CH3-THF (140 mL, 322 mmol) buvo įpilta 2,3 M LiAlH4 tirpalo (140 mL, 322 mmol).
250 mL lašinamąjį piltuvą. Lašelinis piltuvas buvo papildomai praplautas 2-CH3-THF (20 mL). LiAlH4 tirpalas buvo lašinamas lašeliniu būdu
greičiu, kad būtų palaikoma žemesnė nei 20 °C temperatūra. Po pridėjimo ledo vandens vonia buvo pašalinta ir mišinys maišytas 30 min.
Šviesiai geltonas tirpalas buvo kaitinamas iki grįžtamojo srauto (80 °C), naudojant kaitinimo mantiją, ir po 3 val. tapo dramblio kaulo spalvos.
geltonos spalvos kietosios medžiagos kaupėsi ant apvaliadugnės kolbos šonų
2C etapas. Kaitinimo mantija buvo nuimta, o kolba atvėsinta iki 50 °C temperatūros. Kolba vėl buvo
atšaldyta iki 20 °C temperatūros. Reakcija buvo gesinama nuosekliai įlašinus 3 lašus 1 M aq NaOH ir 3 lašus dejonizuoto H2O. Mišinys
praskiestas THF (500 ml) ir maišytas 20 min. Mišinys buvo filtruojamas Büchnerio piltuvėliu, o filtratas laikomas po N2.
Filtravimo pyragas greitai vėl buvo išmaišytas su 200 ml [10 % (7 % amoniako MeOH) tirpalo CH2Cl2] ir THF (500 ml). Filtratai
buvo sujungti ir koncentruoti, kad gautųsi žalia kieta medžiaga. Kietoji medžiaga buvo trituliuota 1:1 EtOAc/heptanu (50 ml), tada filtruota per
Büchnerio piltuvu. Tamsiai žalia kieta medžiaga buvo džiovinta 40 °C temperatūroje per naktį ir gautas sausas psilocinas (7) kaip tamsiai žalia kieta medžiaga; išeiga: 20,7
g (91 %); mp 167-169 °C.
Psilocinas buvo susintetintas.
II dalis: Transderminio psilocino pleistro kūrimas ir in vitro tyrimas (DĖMESIO: JŪS MATYSITE ŠVIESĄ ŽMOGAUS LĖLĘS, JOS BJAURUMAS
Tada ištirpinu psilociną patentuotame akrilato polimero mišinyje (heptane), tada tirpalą supilu į atskyrimo liniją ir liejimo peiliu gaunu 100 um lipnų sluoksnį. Kai išdžiūsta, uždedu pagrindinį sluoksnį ir iškerpu 1 cm^2 dydžio pleistrą. Šis pleistras naudojamas in vitro tyrimui.
Toliau pateiktoje nuotraukoje užfiksuotas difuzijos aparatas (pleistras uždėtas ant odos, o apačioje bėga vanduo).
Tikiuosi, kad jums patiko!
