Rendben srácok! Ideje megosztani veletek némi tudást. Leírok egy szintézist, amelyet a psilocinra végeztem, fotókkal kiegészítve. Az előállított psilocint felhasználtam, és kifejlesztettem egy egyszerű ragtapaszt. Annak érdekében, hogy teszteljük a psilocin permeációját a tapaszban, egy általam összerakott diffúziós készüléket használtunk. Ez több membránt tartalmaz, egy 1 cm^2-es tapasz került egy 1 cm^2-es, 400 um vastagságú friss emberi bőrdarabra (amelyet egy hasplasztikai sebészeti központból adományoztak). A bőr alatt állandó víz áramlik, amelynek pH-ja 7,4 és testhőmérséklete van. A diffúziós készülék óránként 1 ml frakciót képes összegyűjteni, amelyet aztán LC-MS segítségével elemezünk. Az 1 ml-es fiolában lévő pszilocin mennyisége adja a fluxust (mg/óra/cm^2). Ez azt diktálja, hogy cm^2-es foltméret mellett mennyi psilocin halad át óránként.
Ez egyre mélyebbre megy, mivel a psilocin rendkívül instabil. a következő publikáció, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oxidatív psilocin dimerizációval előállított kromofórák szerkezeti tisztázása és spektroszkópiai elemzése), átnézi a kérdést. Amikor a dimer kialakul, HPLC-elemzéssel és ATR-FTIR-rel nem mutatható ki, ami furcsa. Ez a kutatócsoportoknak hamis pozitív eredményeket ad a psilocin tisztaságára vonatkozóan. Találtam egy módot a psilocin stabilizálására a tapaszban.
Mindenesetre kezdjük el! Minden lépést magam végeztem, a társam segítségével, aki vegyészmérnök. Ez még akkor volt, amikor még rendelkeztem egy 1. és 3. listás DEA engedéllyel nemcsak a kutatásra, hanem a gyártásra is.
I. rész (Psilocin szintézis)
1. lépés: 3-[2-(2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-il acetát szintézise
1a. Egy 2000 ml-es, négynyakú, kerekfenekű lombikot felszereltünk egy felső keverővel, J-Kem hőmérséklet-szabályozóval, egy 250 ml-es cseppentő tölcsérrel és egy gumiszeptummal, amelyen keresztül túlnyomásos szárazN2-t juttattunk be. A szeptumot eltávolítottuk, és a lombikot egyenlő arányban töltöttük 1H-indol-4-il-acetáttal (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalens).
és anhidrogén Et2O-t (700 ml). A lombikot újra lezártuk a szeptummal és N2-vel átöblítettük. A szuszpenziót 10 percig kevertettük, majd
30 percig jég-vízfürdőben 0 °C-ra hűtöttük.
1b. A cseppentőtölcsérbe oxalil-klorid (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalens) Et2O-ban (60 mL) oldott oxalil-kloridot (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 ekvivalens) töltöttünk. Az oxalil-klorid oldatot cseppenként adagoltuk olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 5 °C-on vagy az alatt tartsuk, hogy minimalizáljuk a dimer és más lehetséges melléktermék képződését. Az adalékolás előrehaladtával sárga 10-es iszap képződött, és amikor az adalékolás befejeződött, az elegyet 4 órán át kevertettük.
1c. Ezután heptánt (400 ml) adtunk hozzá, és az elegyet 30 percig kevertettük 0 °C-on. A kapott sárga szilárd anyagot gyorsan leszűrtük, és egymás után heptánnal (2 × 300 mL) öblítettük, amelyet gyorsan felhasználtunk a következő lépésben. . Dimetil-amin 2,0 M-os oldatát THF-ben (175 mL) cseppenként adtuk hozzá olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 5 °C alatt tartsuk, hogy a mellékreakciókat minimalizáljuk. Miután a
Miután az adalékolás befejeződött, a THF-ben (100 mL) lévő piridint (46 mL) cseppenként adtuk hozzá, és az elegyet 60 percig jól kevertettük. Heptánt (600 mL) adtunk hozzá, és a lombik tartalmát egyBüchner-tölcséren keresztül szívószűréssel szűrtük. A szűrt maradékot átvittük egy kerekfenekű lombikba, és ionmentesített H2O-t (1000 mL) adtunk hozzá, 30 percig kevertettük, majd Büchner-tölcséren keresztül szűrtük. A törtfehér szilárd anyagot EtOAc-ban (600 mL) és heptánban (400mL) 40 percig egymás után háromszorosítottuk. Az iszapot Büchner-tölcséren keresztül szűrtük, és a szilárd anyagot 40 °C-os kemencében egy éjszakán át szárítottuk, így a 6 világossárga szilárd anyagot kaptunk;hozam: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
Az ATR-FTIR megerősítette a 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilacetát szintézisét. Ez a vegyület 4C-on több hónapig tárolható!
lépés: Psilocin szintézis
2A. lépés: Egy 2000 ml-es, négynyakú, kerekfenekű lombikot felszereltünk egy felső keverővel, J-Kem hőmérséklet-szabályozóval, egy
250 ml-es cseppentő tölcsérrel és gumiszeptummal, amelyen keresztül pozitív nyomású száraz N2-t juttattunk be. A szeptumot eltávolítottuk, és a
a lombikot egymás után feltöltöttük 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-il-acetát (6; 31,5 g, 115 mmol) és 2-CH3-THF (1000 mg) folyadékkal.
mL). A lombikot 0 °C-os jégfürdőbe merítettük, majd 2-CH3-THF-ben lévő 2,3 M LiAlH4 (140 mL, 322 mmol) 2,3 M LiAlH4 oldatát (140 mL, 322 mmol) adtuk hozzá az alábbiakon keresztül
a 250 ml-es cseppentőtölcsérbe. A cseppentőtölcsért további 2-CH3-THF-fel (20 mL) öblítettük. A LiAlH4-oldatot cseppenként adtuk hozzá
olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 20 °C alatt tartsuk. Az adalékolás után a jég-vízfürdőt eltávolítottuk, és az elegyet 30 percig kevertettük.
A világossárga oldatot fűtőköpeny segítségével refluxra (80 °C) melegítettük, és 3 óra elteltével elefántcsontszínűvé vált.
sárga szilárd anyagok felhalmozódását figyeltük meg a kerekfenekű lombik oldalán.
2C. lépés. A fűtőköpenyt eltávolítottuk, és a lombikot hagytuk 50 °C-ra lehűlni. A lombikot ismét
20 °C-ra hűtöttük. A reakciót 3 csepp 1 M NaOH és 3 csepp ionmentesített H2O egymás utáni hozzáadásával oltottuk. Az elegyet
THF-fel (500 ml) hígítottuk és 20 percig kevertettük. Az elegyet Büchner-tölcséren keresztül szűrtük, és a szűrletet N2 alatt tartottuk.
A szűrőpogácsát 200 ml [10%-os (7%-os ammónia MeOH-ban) CH2Cl2 oldat] és THF (500 mL) 200 mL-nyi oldatával gyorsan újra felitattuk. A szűrleteket
ezután egyesítettük és besűrítettük, hogy zöld színű szilárd anyagot kapjunk. A szilárd anyagot 1:1 EtOAc/heptán (50 mL) keverékkel tritráltuk, majd szűrtük a következő szűrőn keresztül
Büchner-tölcséren keresztül. A sötétzöld szilárd anyagot egy éjszakán át 40 °C-on kemencében szárítottuk, hogy sötétzöld szilárd anyagként száraz pszilocint (7) kapjunk; hozam: 20,7 %.
g (91%); mp 167-169 °C.
A pszilocint szintetizálták.
II. rész: Transzdermális Psilocin tapasz kifejlesztése és In-Vitro vizsgálat (VIGYÁZAT: FRISS EMBERI HÚST LÁTOK, AZ ÉRZELMESEN MEGVALÓSODTOK
Ezután feloldom a psilocint egy saját fejlesztésű akrilát polimer keverékben (heptánban), majd az oldatot egy leválasztó vonalba öntöm, és egy öntőkés segítségével 100 um-os ragasztóréteget készítek. Miután megszáradt, felviszem a hátlapi réteget és kilyukasztok egy 1 cm^2-es tapaszt. Ezt a tapaszt használom az in vitro vizsgálathoz.
A következő kép a diffúziós készülék pillanatképe (a tapasz a bőr tetején, alatta víz folyik).
Remélem, tetszett!
Ez egyre mélyebbre megy, mivel a psilocin rendkívül instabil. a következő publikáció, Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oxidatív psilocin dimerizációval előállított kromofórák szerkezeti tisztázása és spektroszkópiai elemzése), átnézi a kérdést. Amikor a dimer kialakul, HPLC-elemzéssel és ATR-FTIR-rel nem mutatható ki, ami furcsa. Ez a kutatócsoportoknak hamis pozitív eredményeket ad a psilocin tisztaságára vonatkozóan. Találtam egy módot a psilocin stabilizálására a tapaszban.
Mindenesetre kezdjük el! Minden lépést magam végeztem, a társam segítségével, aki vegyészmérnök. Ez még akkor volt, amikor még rendelkeztem egy 1. és 3. listás DEA engedéllyel nemcsak a kutatásra, hanem a gyártásra is.
I. rész (Psilocin szintézis)
1. lépés: 3-[2-(2-(Dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-il acetát szintézise
1a. Egy 2000 ml-es, négynyakú, kerekfenekű lombikot felszereltünk egy felső keverővel, J-Kem hőmérséklet-szabályozóval, egy 250 ml-es cseppentő tölcsérrel és egy gumiszeptummal, amelyen keresztül túlnyomásos szárazN2-t juttattunk be. A szeptumot eltávolítottuk, és a lombikot egyenlő arányban töltöttük 1H-indol-4-il-acetáttal (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalens).
és anhidrogén Et2O-t (700 ml). A lombikot újra lezártuk a szeptummal és N2-vel átöblítettük. A szuszpenziót 10 percig kevertettük, majd
30 percig jég-vízfürdőben 0 °C-ra hűtöttük.
1b. A cseppentőtölcsérbe oxalil-klorid (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalens) Et2O-ban (60 mL) oldott oxalil-kloridot (37,1 mL, 428 mmol, 1,5 ekvivalens) töltöttünk. Az oxalil-klorid oldatot cseppenként adagoltuk olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 5 °C-on vagy az alatt tartsuk, hogy minimalizáljuk a dimer és más lehetséges melléktermék képződését. Az adalékolás előrehaladtával sárga 10-es iszap képződött, és amikor az adalékolás befejeződött, az elegyet 4 órán át kevertettük.
1c. Ezután heptánt (400 ml) adtunk hozzá, és az elegyet 30 percig kevertettük 0 °C-on. A kapott sárga szilárd anyagot gyorsan leszűrtük, és egymás után heptánnal (2 × 300 mL) öblítettük, amelyet gyorsan felhasználtunk a következő lépésben. . Dimetil-amin 2,0 M-os oldatát THF-ben (175 mL) cseppenként adtuk hozzá olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 5 °C alatt tartsuk, hogy a mellékreakciókat minimalizáljuk. Miután a
Miután az adalékolás befejeződött, a THF-ben (100 mL) lévő piridint (46 mL) cseppenként adtuk hozzá, és az elegyet 60 percig jól kevertettük. Heptánt (600 mL) adtunk hozzá, és a lombik tartalmát egyBüchner-tölcséren keresztül szívószűréssel szűrtük. A szűrt maradékot átvittük egy kerekfenekű lombikba, és ionmentesített H2O-t (1000 mL) adtunk hozzá, 30 percig kevertettük, majd Büchner-tölcséren keresztül szűrtük. A törtfehér szilárd anyagot EtOAc-ban (600 mL) és heptánban (400mL) 40 percig egymás után háromszorosítottuk. Az iszapot Büchner-tölcséren keresztül szűrtük, és a szilárd anyagot 40 °C-os kemencében egy éjszakán át szárítottuk, így a 6 világossárga szilárd anyagot kaptunk;hozam: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
Az ATR-FTIR megerősítette a 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-ilacetát szintézisét. Ez a vegyület 4C-on több hónapig tárolható!
lépés: Psilocin szintézis
2A. lépés: Egy 2000 ml-es, négynyakú, kerekfenekű lombikot felszereltünk egy felső keverővel, J-Kem hőmérséklet-szabályozóval, egy
250 ml-es cseppentő tölcsérrel és gumiszeptummal, amelyen keresztül pozitív nyomású száraz N2-t juttattunk be. A szeptumot eltávolítottuk, és a
a lombikot egymás után feltöltöttük 3-[2-(2-(dimetilamino)-2-oxoacetil]-1H-indol-4-il-acetát (6; 31,5 g, 115 mmol) és 2-CH3-THF (1000 mg) folyadékkal.
mL). A lombikot 0 °C-os jégfürdőbe merítettük, majd 2-CH3-THF-ben lévő 2,3 M LiAlH4 (140 mL, 322 mmol) 2,3 M LiAlH4 oldatát (140 mL, 322 mmol) adtuk hozzá az alábbiakon keresztül
a 250 ml-es cseppentőtölcsérbe. A cseppentőtölcsért további 2-CH3-THF-fel (20 mL) öblítettük. A LiAlH4-oldatot cseppenként adtuk hozzá
olyan ütemben, hogy a hőmérsékletet 20 °C alatt tartsuk. Az adalékolás után a jég-vízfürdőt eltávolítottuk, és az elegyet 30 percig kevertettük.
A világossárga oldatot fűtőköpeny segítségével refluxra (80 °C) melegítettük, és 3 óra elteltével elefántcsontszínűvé vált.
sárga szilárd anyagok felhalmozódását figyeltük meg a kerekfenekű lombik oldalán.
2C. lépés. A fűtőköpenyt eltávolítottuk, és a lombikot hagytuk 50 °C-ra lehűlni. A lombikot ismét
20 °C-ra hűtöttük. A reakciót 3 csepp 1 M NaOH és 3 csepp ionmentesített H2O egymás utáni hozzáadásával oltottuk. Az elegyet
THF-fel (500 ml) hígítottuk és 20 percig kevertettük. Az elegyet Büchner-tölcséren keresztül szűrtük, és a szűrletet N2 alatt tartottuk.
A szűrőpogácsát 200 ml [10%-os (7%-os ammónia MeOH-ban) CH2Cl2 oldat] és THF (500 mL) 200 mL-nyi oldatával gyorsan újra felitattuk. A szűrleteket
ezután egyesítettük és besűrítettük, hogy zöld színű szilárd anyagot kapjunk. A szilárd anyagot 1:1 EtOAc/heptán (50 mL) keverékkel tritráltuk, majd szűrtük a következő szűrőn keresztül
Büchner-tölcséren keresztül. A sötétzöld szilárd anyagot egy éjszakán át 40 °C-on kemencében szárítottuk, hogy sötétzöld szilárd anyagként száraz pszilocint (7) kapjunk; hozam: 20,7 %.
g (91%); mp 167-169 °C.
A pszilocint szintetizálták.
II. rész: Transzdermális Psilocin tapasz kifejlesztése és In-Vitro vizsgálat (VIGYÁZAT: FRISS EMBERI HÚST LÁTOK, AZ ÉRZELMESEN MEGVALÓSODTOK
Ezután feloldom a psilocint egy saját fejlesztésű akrilát polimer keverékben (heptánban), majd az oldatot egy leválasztó vonalba öntöm, és egy öntőkés segítségével 100 um-os ragasztóréteget készítek. Miután megszáradt, felviszem a hátlapi réteget és kilyukasztok egy 1 cm^2-es tapaszt. Ezt a tapaszt használom az in vitro vizsgálathoz.
A következő kép a diffúziós készülék pillanatképe (a tapasz a bőr tetején, alatta víz folyik).
Remélem, tetszett!
