Hea küll, poisid! Aeg on jagada teiega teadmisi. Ma kirjeldan psiilotsiini sünteesi, mida ma tegin, koos fotodega. Kasutasin toodetud psilotsiini ja töötasin välja lihtsa kleepsu. Selleks, et testida psilotsiini läbilaskmist plaastris, kasutasime difusiooniaparaati, mille ma kokku panin. See hõlmab mitut membraani, kusjuures 1 cm^2 plaaster asetati 1 cm^2 värske inimese naha 400 umi paksuse tüki peale (annetatud kõhukirurgia keskusest). Naha all on pidev veevool, mille pH on 7,4 ja kehatemperatuur. Diffusiooniaparatuur suudab koguda 1mL fraktsiooni tunnis, mida seejärel analüüsitakse LC-MS abil. Psiilotsiini kogus 1mL viaalis annab voolu (mg/hr/cm^2). See määrab, kui palju psilotsiini läbib tunnis cm^2 suuruse plaastri korral.
See läheb sügavamale, sest psilotsiin on väga ebastabiilne. järgmises väljaandes Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oksüdatiivse psilotsiini dimeerimise teel toodetud kromofooride struktuuri selgitamine ja spektroskoopiline analüüs) käsitletakse seda teemat. Kui dimeer moodustub, ei ole see HPLC-analüüsi ja ATR-FTIR-analüüsi abil tuvastatav, mis on kummaline. See annab uurimisrühmadele valepositiivseid tulemusi nende psilotsiini puhtuse kohta. Olen leidnud viisi, kuidas stabiliseerida psilotsiini plaasteris.
Igatahes, alustame! Ma tegin iga sammu ise, kasutades oma partneri abi, kes on keemiainsener. See oli siis, kui mul oli nimekiri1 ja 3 DEA litsents mitte ainult teadusuuringuteks, vaid ka tootmiseks.
I osa (Psilotsiini süntees)
1. samm: 3-[2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaadi süntees.
1a. 2000 ml neljakaelaline ümarpõhjaline kolb oli varustatud segisti, J-Kem temperatuuriregulaatori, 250 ml tilkumislehtri ja kummist vaheseinaga, mille kaudu sisestati kuivaN2 positiivse rõhu all. Septum eemaldati ja kolbi täideti võrdselt 1H-indool-4-üülatsetaadiga (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalent).
ja anhyd Et2O (700 ml). Kolb suleti uuesti septumiga ja loputati N2-ga. Suspensiooni segati 10 minutit ja seejärel
jahutati jääveevannis 30 min 0 °C-ni.
1b. Tilgutuslehtrisse lisati oksalüülkloriidi (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalenti) lahus Et2O-s (60 ml). Oksalüülkloriidi lahust lisati tilkhaaval piisava kiirusega, et hoida temperatuur 5 °C või alla selle, et vähendada dimeeri ja muude võimalike kõrvalsaaduste moodustumist. Lisamise edenedes tekkis 10 kollane sete ja kui lisamine oli lõpetatud, segati segu 4 tundi.
1c. Pärast seda lisati heptaan (400 ml) ja segu segati 30 minutit 0 °C juures. Saadud kollane tahke aine filtreeriti kiiresti ja loputati järjestikku heptaaniga (2 × 300 ml), mida kasutati kiiresti järgmises etapis. . Dimetüülamiini 2,0 M lahust THFis (175 ml) lisati tilguti kaupa piisava kiirusega, et hoida temperatuur alla 5 °C, et minimeerida kõrvalreaktsioone. Pärast seda, kui
lisati püridiin (46 ml) THFis (100 ml) tilkhaaval ja segu segati hästi 60 minutit. Lisati heptaan (600 mL) ja kolvi sisu filtreeriti Büchneri lehtri kaudu. Filtreeritud jääk viidi üle ümarpõhjalisse kolbi ja lisati deioniseeritud H2O (1000 ml), segati 30 minutit ja filtreeriti Büchneri lehtri kaudu. Valge tahke aine tritueeriti järjestikku 40 minutit EtOAc-s (600 ml) ja heptaanis (400 ml). Sete filtreeriti Büchneri nõela kaudu ja tahke aine kuivatati ahjus 40 °C juures üle öö, et saada 6 helekollase tahkisena; saagis: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR kinnitas 3-[2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaadi sünteesi. Seda ühendit võib säilitada 4C juures mitu kuud!
2. samm: Psilotsiini süntees
Samm 2A: 2000 ml neljakaelaline ümarpõhjaline kolb varustati ülevalpool asuva segisti, J-Kem temperatuuri kontrolleri, J-Kem
250 mL tilgutuslehtriga ja kummist vaheseinaga, mille kaudu sisestati kuiva N2 positiivse rõhu all. Septum eemaldati ja
kolbi lisati järjestikku 3-[2-(2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaat (6; 31,5 g, 115 mmol) ja 2-CH3-THF (1000 mg).
mL). Kolb uputati 0 °C juures asuvasse jäävanni ja lisati 2,3 M LiAlH4 lahus 2-CH3-THFis (140 ml, 322 mmol) läbi
250 mL tilgutuslehtrit. Tilgutuslehtrit loputati täiendava 2-CH3-THFiga (20 mL). LiAlH4 lahus lisati tilkhaaval
sellises koguses, et temperatuur jääks alla 20 °C. Pärast lisamist eemaldati jääveevann ja segu segati 30 minutit.
Helekollane lahus kuumutati kuumutusmantliga tagasilöögini (80 °C) ja muutus 3 tunni pärast elevandiluuvärviliseks.
täheldati kollaste tahkete ainete kogunemist ümarpõhjalise kolvi külgedele.
Samm 2C. Kuumutusmantel eemaldati ja kolbil lastakse jahtuda 50 °C-ni. Kolb oli taas
jahutati uuesti 20 °C-ni. Reaktsiooni jahutati, lisades järjestikku 3 tilka 1 M NaOH ja 3 tilka deioniseeritud H2O. Segu
lahjendati THFiga (500 ml) ja segati 20 minutit. Segu filtreeriti Büchneri lehtri kaudu ja filtraati hoiti N2 all.
Filtrikooki kuivatati kiiresti uuesti 200 ml [10%-lise (7% ammoniaagi lahuse MeOH-s) CH2Cl2-s] ja THF-ga (500 ml). Filtraadid
ühendati ja kontsentreeriti, et saada roheline tahke aine. Tahke aine tiisutati 1:1 EtOAc/heptaan (50 mL), seejärel filtreeriti läbi
Büchneri lehtri kaudu. Tumeroheline tahke aine kuivatati ahjus 40 °C juures üle öö, et saada kuiva psiilotsiini (7) tumerohelise tahkena; saagis: 20,7 %.
g (91%); mp 167-169 °C.
Psilotsiin on sünteesitud.
II osa: Transdermaalse Psilocin plaastri väljatöötamine ja in vitro uuring (ETTEVAATUST: SINU TULEB NÄGEMA FRESH HUMAN FLESH, SEE GRASS
Seejärel lahustan psilotsiini patenteeritud akrülaatpolümeeri segusse (heptaanis), seejärel valan lahuse eraldusjoonele ja kasutan valunõela, et saada kleepuv kiht 100 umi suuruseks. Pärast kuivamist panen peale tugikihi ja löön välja 1 cm^2 suuruse plaastri. Seda plaastrit kasutatakse in vitro uuringus.
Järgmine foto on hetkeseisund difusiooniseadmest (plaaster naha peal, mille all jookseb vesi).
Loodan, et teile meeldis!
See läheb sügavamale, sest psilotsiin on väga ebastabiilne. järgmises väljaandes Structure Elucidation and Spectroscopic Analysis of Chromophores Produced by Oxidative Psilocin Dimerization (Oksüdatiivse psilotsiini dimeerimise teel toodetud kromofooride struktuuri selgitamine ja spektroskoopiline analüüs) käsitletakse seda teemat. Kui dimeer moodustub, ei ole see HPLC-analüüsi ja ATR-FTIR-analüüsi abil tuvastatav, mis on kummaline. See annab uurimisrühmadele valepositiivseid tulemusi nende psilotsiini puhtuse kohta. Olen leidnud viisi, kuidas stabiliseerida psilotsiini plaasteris.
Igatahes, alustame! Ma tegin iga sammu ise, kasutades oma partneri abi, kes on keemiainsener. See oli siis, kui mul oli nimekiri1 ja 3 DEA litsents mitte ainult teadusuuringuteks, vaid ka tootmiseks.
I osa (Psilotsiini süntees)
1. samm: 3-[2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaadi süntees.
1a. 2000 ml neljakaelaline ümarpõhjaline kolb oli varustatud segisti, J-Kem temperatuuriregulaatori, 250 ml tilkumislehtri ja kummist vaheseinaga, mille kaudu sisestati kuivaN2 positiivse rõhu all. Septum eemaldati ja kolbi täideti võrdselt 1H-indool-4-üülatsetaadiga (5; 50,1 g, 285 mmol, 1 ekvivalent).
ja anhyd Et2O (700 ml). Kolb suleti uuesti septumiga ja loputati N2-ga. Suspensiooni segati 10 minutit ja seejärel
jahutati jääveevannis 30 min 0 °C-ni.
1b. Tilgutuslehtrisse lisati oksalüülkloriidi (37,1 ml, 428 mmol, 1,5 ekvivalenti) lahus Et2O-s (60 ml). Oksalüülkloriidi lahust lisati tilkhaaval piisava kiirusega, et hoida temperatuur 5 °C või alla selle, et vähendada dimeeri ja muude võimalike kõrvalsaaduste moodustumist. Lisamise edenedes tekkis 10 kollane sete ja kui lisamine oli lõpetatud, segati segu 4 tundi.
1c. Pärast seda lisati heptaan (400 ml) ja segu segati 30 minutit 0 °C juures. Saadud kollane tahke aine filtreeriti kiiresti ja loputati järjestikku heptaaniga (2 × 300 ml), mida kasutati kiiresti järgmises etapis. . Dimetüülamiini 2,0 M lahust THFis (175 ml) lisati tilguti kaupa piisava kiirusega, et hoida temperatuur alla 5 °C, et minimeerida kõrvalreaktsioone. Pärast seda, kui
lisati püridiin (46 ml) THFis (100 ml) tilkhaaval ja segu segati hästi 60 minutit. Lisati heptaan (600 mL) ja kolvi sisu filtreeriti Büchneri lehtri kaudu. Filtreeritud jääk viidi üle ümarpõhjalisse kolbi ja lisati deioniseeritud H2O (1000 ml), segati 30 minutit ja filtreeriti Büchneri lehtri kaudu. Valge tahke aine tritueeriti järjestikku 40 minutit EtOAc-s (600 ml) ja heptaanis (400 ml). Sete filtreeriti Büchneri nõela kaudu ja tahke aine kuivatati ahjus 40 °C juures üle öö, et saada 6 helekollase tahkisena; saagis: 66,1 g (81%); mp 205-207 °C.
ATR-FTIR kinnitas 3-[2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaadi sünteesi. Seda ühendit võib säilitada 4C juures mitu kuud!
2. samm: Psilotsiini süntees
Samm 2A: 2000 ml neljakaelaline ümarpõhjaline kolb varustati ülevalpool asuva segisti, J-Kem temperatuuri kontrolleri, J-Kem
250 mL tilgutuslehtriga ja kummist vaheseinaga, mille kaudu sisestati kuiva N2 positiivse rõhu all. Septum eemaldati ja
kolbi lisati järjestikku 3-[2-(2-(dimetüülamino)-2-oksoatsetüül]-1H-indool-4-üülatsetaat (6; 31,5 g, 115 mmol) ja 2-CH3-THF (1000 mg).
mL). Kolb uputati 0 °C juures asuvasse jäävanni ja lisati 2,3 M LiAlH4 lahus 2-CH3-THFis (140 ml, 322 mmol) läbi
250 mL tilgutuslehtrit. Tilgutuslehtrit loputati täiendava 2-CH3-THFiga (20 mL). LiAlH4 lahus lisati tilkhaaval
sellises koguses, et temperatuur jääks alla 20 °C. Pärast lisamist eemaldati jääveevann ja segu segati 30 minutit.
Helekollane lahus kuumutati kuumutusmantliga tagasilöögini (80 °C) ja muutus 3 tunni pärast elevandiluuvärviliseks.
täheldati kollaste tahkete ainete kogunemist ümarpõhjalise kolvi külgedele.
Samm 2C. Kuumutusmantel eemaldati ja kolbil lastakse jahtuda 50 °C-ni. Kolb oli taas
jahutati uuesti 20 °C-ni. Reaktsiooni jahutati, lisades järjestikku 3 tilka 1 M NaOH ja 3 tilka deioniseeritud H2O. Segu
lahjendati THFiga (500 ml) ja segati 20 minutit. Segu filtreeriti Büchneri lehtri kaudu ja filtraati hoiti N2 all.
Filtrikooki kuivatati kiiresti uuesti 200 ml [10%-lise (7% ammoniaagi lahuse MeOH-s) CH2Cl2-s] ja THF-ga (500 ml). Filtraadid
ühendati ja kontsentreeriti, et saada roheline tahke aine. Tahke aine tiisutati 1:1 EtOAc/heptaan (50 mL), seejärel filtreeriti läbi
Büchneri lehtri kaudu. Tumeroheline tahke aine kuivatati ahjus 40 °C juures üle öö, et saada kuiva psiilotsiini (7) tumerohelise tahkena; saagis: 20,7 %.
g (91%); mp 167-169 °C.
Psilotsiin on sünteesitud.
II osa: Transdermaalse Psilocin plaastri väljatöötamine ja in vitro uuring (ETTEVAATUST: SINU TULEB NÄGEMA FRESH HUMAN FLESH, SEE GRASS
Seejärel lahustan psilotsiini patenteeritud akrülaatpolümeeri segusse (heptaanis), seejärel valan lahuse eraldusjoonele ja kasutan valunõela, et saada kleepuv kiht 100 umi suuruseks. Pärast kuivamist panen peale tugikihi ja löön välja 1 cm^2 suuruse plaastri. Seda plaastrit kasutatakse in vitro uuringus.
Järgmine foto on hetkeseisund difusiooniseadmest (plaaster naha peal, mille all jookseb vesi).
Loodan, et teile meeldis!
